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染色体DNA提取完毕后

来源: 俄罗斯优格拉地区临床医院 类型: 染色体DNA模型 时间: 2021-08-03 10:22

非染色体DNA的提取DNADNA,2.3.2幽门螺杆菌染色体DNA消化从Cp397(慢性胃炎、溃疡病)、Cp400(十二指肠溃疡)、Cp407(浅表萎缩性胃炎)三种不同胃病患者的胃黏膜中分离幽门螺杆菌,提取染色体DNA后,用Bg1Ⅱ酶解,每根管置于37°C水浴中2.5h电泳40V。2h和30v17h。电泳后将琼脂糖凝胶(加入EB)置于紫外线下,灯下观察照片。可以看出,不同弯曲菌HindⅢPstIeyXbaI的消化模式不同,但PstI消化的条带模式更清晰。经过较长时间的储存,染色体DNA限制模式完全一致。

1材料和方法

1、2培养基试验用培养基用改良布氏琼脂及布氏肉汤均按参考文献配制。

2、3染色体DNA提取弯曲菌经37°C48h在混合气体(10%CO2,5%O2,85%N条件下培养,每个平皿20mlT.E洗菌,置30ml的离心管,经5000rpm/分离心10min,弃上清,沉淀用10mlT.E悬浮,加10%SDS1.5ml于65°C水浴中1h;用酚抽提3次,酚/氯仿异戊醇抽提5次以上,再用氯仿抽提2次;

3、4弯曲菌染色体DNA酶切用PstⅠ,HindⅢE.coRI,Bg1Ⅱ,XbaⅠ五种酶进行试验,各种酶均购自中国医学科学院基础医学研究所。

4、1过氧化氢酶阳性弯曲菌的生物学特性

5、对于-70°C条件下保存不同时间的弯曲菌主要生物学生物学特性:生长温度,1%甘氨酸的生长,对萘啶酮酸敏感性,尿素酶活必以及马尿酸水解,进行了检查与比较,基本特性与初分离时相同,其结果见表1。

6、2弯曲菌于低温(-70°C)条件下存活检查

7、表1过氧化氢酶阳性弯曲菌经-70°C保存后生物学特性

8、菌株生长温度1%甘氨酸生长对萘啶酮酸抗性尿素酶试验马尿酸水解

染色体DNA提取完毕后

染色体DNA的提取

实验目的和原理DNA是遗传信息的载体,是最重要的生物信息分子,是分子生物学研究的主要对象。DNA提取是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作。

在本实验中,植物样品在液氮下粉碎组织,用裂解液裂解细胞,反复提取有机溶剂,从水相和蛋白质组分中分离DNA。在RNase的作用下,RNA被降解纯化DNA。

材料与方法培养设备:超净工作台、培养箱、摇床、恒温水浴、高速冷冻离心机、台式离心机、移液枪一套、低温冰箱、冷冻真空干燥机、电泳仪、水平电泳槽、紫外观察试剂:celllysate100mMTris-HCl5mMEDTA500mMNaCl1.25%SDSPH7.5饱和苯酚,氯仿/异戊醇,苯酚/氯仿/异戊醇无水乙醇,70%乙醇,异丙醇,3MNaAcpH5。

RNase,50×TE缓冲液,电泳加载缓冲液。操作步骤培养细菌和添加10毫升的溶解产物,1/10体积的苯酚,在65℃20-30分钟,然后添加一个相同体积的氯仿,12000-15000rpm轻轻摇匀15分钟上液体,添加同等体积的氯仿,轻轻摇晃,12000-15000rpm为15分钟上液体,加入0.6倍体积的冷异丙醇(-20℃)或2倍体积的冷无水乙醇(-20℃),加入1/10体积的3mNaAc(pH5。

染色体DNA提取完毕后

染色体DNA提取

1、PCR、染色体DNA提取选择题1.关于PCR扩增停滞的原因有很多种,但下列各项中(B)项不是主要原因。A.底物(模板)过剩B.dNTP的大量消耗C.产物的聚集D.非特异性产物的竞争性抑制2.Clark作了一个有趣的实验,发现TaqDNA聚合酶可以不需要模板,在双链DNA的末端加一个碱基,主要是加(B)A.dGTPB.dATPC.dCTPD.dTTP3.有简并引物的3’端尽量使用具有简并密码的氨基酸,这是因为(A)A.TaqDNA聚合酶具有一定的不精确性B.便于排除错误碱基的掺入C.易于退火D.易于重组连接4.PCR实验的特异性主要取决于(C)A.DNA聚合酶的种类B.反应体系中模板DNA的量C.引物序列的结构和长度D.四种dNTP的浓度E.循环周期的次数5.有关PCR的描述下列哪项不正确:(D)A.是一种酶促反应B.引物决定了扩增的特异性C.扩增的产量按Y=m(1+X)nD.扩增的对象是氨基酸序列E.扩增的对象是DNA序列6.有关PCR的描述下列哪项正确:(ABC)A.polymerasechainreaction的字首缩写B.1993年获诺贝尔化学奖C.已广泛的应用于医学各学科D.能够准确对扩增模板定量E.以上都对7.PCR反应产物的特异性取决于(E)A镁离子浓度B退火温度C引物碱基组成和长度D循环次数E.A+B+C填空1.Clark发现用TaqDNA聚合酶得到的PCR反应产物不是平末端,而是有一个突出碱基末端的双链DNA分子。

染色体DNA提取完毕后

染色体数与核DNA数

道德教育滞后或超前于社会发展,是道德教育的集中表现。()A.继承性B.相对独立性C.平衡性D.一致性A.关于阶级集体的叙述是正确的。道德教育的重要力量和手段。班集体是现代德育自发形成的基本特征。在德育过程中,要从思想、内容、原则、方法等方面吸收和利用以往发展阶段的成果来丰富和发展自己,并试图描述德育过程中学生道德的形成过程。

幽门螺杆菌(Helicobacterpylori)是近年来在人体胃组织中发现的一种细菌,与胃和胃溃疡的发生密切相关,而空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)是近十年来国内外学者较为关注的一种腹泻病原体。这些细菌的营养需求和培养条件都比较高,特别是在菌株的保存方面。到目前为止仍有许多问题。为了更好地开展对这些疾病的基础研究,我们采用不同类型的弯曲杆菌保存在肉汤和全羊血液中。在不同时间检查存活、生物学特性和染色体DNA消化图谱。实验表明,这种保存方法可以保持较好的存活率、细菌形态和生物学特性。染色体DNA消化的条带模式前后都是一致的。

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